근래에는 수정란을 -196℃의 액체질소 속에 오랜 기간 보존 후 대리모가 준비된 경우 간단하게 융해한 후 바로 이식할 수 있는 ‘직접이식법’이 전 세계적으로 널리 이용되고 있어 이를 소개하고자 합니다. 이 방법은 1.5M의 Ethylene Glycol(EG)이라는 화학물질을 이용하여 수정란 애 상해를 최소화하면서 수정란을 보관할 수 있는 방법인데, 이 방법을 간략히 설명하면 1.5M EG(50%) 5분 침지 → 1.5M EG(75%) 5분 침지 → 마지막 단계로 1.5M EG(100%) 10분 침지한 후 수정란을 0.25mℓ 스트로 내에 흡입하고 봉합한 다음 액체질소 또는 알코올을 냉매로 이용하는 수정란 동결기에 장착하여 분당 -0.3℃ 수준으로 온도가 하강하도록 프로그램을 운용하여 -5℃에서는 수정란이 장착된 스트로 일부분에 액체질소 온도만큼 차가운 금속 파이펫으로 접촉 seeding(결빙개시 조작)을 하고, 90여분 내외 시간이 지나면 -30℃에 도달하여 수정란을 액체질소 속에 영구보존하는 방법을 이용합니다.
수정란 동결을 위해 조작을 하는 실내는 20℃ 내외의 실온이 유지되는 곳에서 동결을 위한 수정란 조작을 실시를 해야 수정란의 동결 후 생존에 유리하고 동결이 완료된 수정란은 -196℃의 액체질소에서 수란우가 준비될 때까지 보관을 하던지, 계획적인 이식시 융해 후 사용하면 고능력 송아지를 생산할 수 있습니다. 직접이식이 가능한 방법으로 동결하고 수정란을 융해해서 이식하는 경우에는 이식을 위해 수정란이 들어있는 스트로를 공기 중에 10초 내외로 노출한 다음 37℃의 온수에서 10초 내외로 완전한 융해를 하여 스트로 내 봉합부위의 기포가 약간 제거되는 수준 상부의 약 0.5cm 자른 다음 수정란 이식기구에 오염 없이 장착을 하여 황체의 발달 수준이 양호하고 자궁이 건강한 개체에 대해 외음부 등에 청결 조치가 완료된 대리모에 신속하게 이식을 하면 됩니다. 수정란이 외부에 노출되는 시간을 최대한 줄이고 수란우의 스트레스가 가장 적도록 기술적으로 능숙하게 이식하는 것이 수정란 이식의 성공률 상승에 도움이 됩니다.
